Pengaruh Kandungan Silika Diatom pada Penggembalaan Protozoa (2)

Pengaruh Kandungan Silika Diatom pada Penggembalaan Protozoa (2)

Bahan dan metode

Organisme Eksperimental dan Kondisi Kultur

Thalassiosira diatom. weissflogii dan T. pseudonana dipertahankan dalam pertumbuhan eksponensial dalam media f/2+Si (Guillard dan Ryther, 1962). Untuk sebagian besar percobaan, kedua spesies disimpan pada suhu 22 ± 1°C dalam siklus terang:gelap 12:12 jam, di bawah intensitas cahaya 15 mol foton m−2 s−1 dan 200 mol foton m−2 s−1, untuk menghasilkan sel dengan kandungan silika seluler yang tinggi dan rendah. Namun, dalam percobaan penggembalaan pertama, T. pseudonana dikultur pada 23 ± 1°C dalam siklus terang:gelap 14:10 dengan intensitas cahaya 5 mol foton m−2 s−1 dan 88 mol foton m−2 s 1 untuk menghasilkan sel dengan kandungan silika seluler yang tinggi dan rendah, masing-masing. Kultur diatom dipindahkan setiap 4 dan 8 hari untuk batch cahaya tinggi dan rendah, masing-masing.

Dinoflagellata heterotrofik N. scintillans dan ciliate Euplotes sp. digunakan sebagai penggembala dalam penelitian ini. N. scintillans diberi makan dengan T. weissflogii pada konsentrasi ~1 mg C L−1, dan makanan alga ini diisi ulang setiap 3 hari. Sebagai percobaan awal menunjukkan bahwa terus menerus gemetar dan rotasi menyebabkan efek merusak pada pertumbuhan N. scintillans, budaya ini hanya perlahan diaduk secara manual 1-2 kali sehari untuk menjaga item mangsa terdistribusi secara homogen. Sel N. scintillans dikumpulkan dengan penyaringan terbalik melalui mesh 100 m, dan dipindahkan ke air laut yang baru disaring dan diautoklaf setiap 2 minggu. Euplot sp. disimpan dalam air laut yang disaring dengan autoklaf yang mengandung ekstrak ragi 0,005%, dan dipindahkan ke media segar setiap 2 minggu. Kultur predator ini dipelihara dalam tingkat cahaya rendah di bawah kondisi yang sama dengan mangsa diatom mereka.

Kultur disimpan di bawah kondisi cahaya masing-masing untuk setidaknya 3 transfer sebelum setiap percobaan. Jumlah silika biogenik (bSiO2) dalam sel diatom diukur mengikuti prosedur yang dijelaskan oleh Grasshoff et al. (1999). Sel C, N dan P diatom dalam percobaan penggembalaan kedua juga diukur dengan menyaring 10-15 ml biakan ke dalam filter GF/F yang telah dibakar sebelumnya, dan menyimpan filter pada -80 °C hingga analisis. Sel C dan N dianalisis dengan penganalisis unsur CHN (Perkin-Elmer) dan P seluler dianalisis sebagai orto-fosfat setelah hidrolisis oksidatif asam dengan 1% HCl (Grasshoff et al., 1999). Ukuran sel mangsa diatom ditentukan dengan menggunakan Coulter Counter (Beckman Coulter, Z2 Coulter Particle Count dan Size Analyzer).

Eksperimen Penggembalaan

Dua set percobaan penggembalaan dilakukan. Dalam rangkaian percobaan pertama, dinoflagellata heterotrofik N. scintillans dan ciliate Euplotes sp. digunakan sebagai penggembala, dan mereka diberi makan secara terpisah dengan T. pseudonana yang mengandung silika tingkat tinggi atau rendah (Tabel 1), dicapai melalui kultur pada intensitas cahaya yang berbeda seperti dijelaskan di atas. N. scintillans dan Euplotes sp. diadaptasikan ke T. pseudonana 1 minggu sebelum percobaan. 

Stok kedua predator ini dikonsentrasikan menggunakan penyaringan terbalik untuk menghilangkan mangsa dari media. Mereka kemudian disuspensikan kembali dalam air laut autoklaf yang disaring 0,2 m, dan dibiarkan kelaparan selama 1-2 hari untuk mengosongkan vakuola makanan mereka sebelum dimulainya percobaan. Pemeriksaan mikroskopis dilakukan untuk memverifikasi bahwa predator masih aktif setelah kelaparan. N. scintillans yang kelaparan (konsentrasi akhir 4 sel ml−1) dan Euplotes sp. (konsentrasi akhir 75 sel ml-1) kemudian ditempatkan ke dalam setiap suspensi makanan (~ 1mg Cl-1) dalam botol polikarbonat 125 ml dengan lima ulangan. 

Dua botol berisi item mangsa tanpa penggembala digunakan sebagai kontrol. Semua botol disimpan dalam kondisi cahaya rendah (yaitu, 5 mol foton m−2 s−1), di bawah kondisi yang sama seperti yang dijelaskan di atas (23 ± 1°C dalam 14:10 jam terang: siklus gelap), untuk 1 hari. Kultur diaduk perlahan secara manual 2-3 kali sehari untuk menghindari agregasi dan penyelesaian sel.

Seperti disebutkan sebelumnya, mekar N. scintillans biasanya dikaitkan dengan mekar diatom (Elbrächter dan Qi, 1998; Harrison et al., 2011). Jadi, dalam seri kedua percobaan penggembalaan N. scintillans sendiri digunakan sebagai predator, untuk menyelidiki lebih lanjut apakah kandungan silika diatom dapat mempengaruhi preferensi makan dinoflagellata pembentuk mekar ini. 

Karena sulit untuk membedakan antara sel diatom yang mengandung silika tingkat tinggi atau rendah berdasarkan morfologi saja, dalam percobaan ini, N. scintillans diberi pakan campuran dengan memasangkan diatom yang mengandung silika tingkat tinggi atau rendah, dengan referensi mangsa alga. Dengan demikian T. weissflogii dipasangkan dengan Platymonas helgolandica dan T. pseudonana dipasangkan dengan Dunaliella salina. N. scintillans juga diberi makan mangsa tunggal, seperti yang dijelaskan dalam percobaan penggembalaan pertama, tetapi dalam percobaan ini durasi makan hanya berlangsung selama 6 jam. 

Kedua ganggang referensi sebelumnya telah dilaporkan menjadi mangsa yang baik untuk N. scintillans, dan mereka berada dalam kisaran ukuran yang sama dengan spesies diatom berpasangan (Zhang et al., 2016). Rasio dua mangsa dalam diet campuran adalah ~1:1 berdasarkan biomassa karbon yang diukur sebelumnya (Zhang et al., 2016), dan total konsentrasi mangsa untuk semua perlakuan makanan disesuaikan menjadi ~1 mg CL−1 .

Subsampel untuk menentukan kelimpahan predator dan mangsa dikumpulkan pada awal dan akhir masa inkubasi, dan diawetkan dalam larutan asam Lugol (konsentrasi akhir 2%). Tingkat konsumsi dan pembersihan, dan indeks konsumsi mangsa N. scintillans untuk masing-masing mangsa ditentukan. Tingkat konsumsi, tingkat pembersihan dan konsentrasi mangsa dan pemangsa rata-rata dihitung, seperti yang dijelaskan oleh Frost (1972). Indeks konsumsi mangsa (nilai dari 0 hingga 1; Zhang et al., 2016), indikator preferensi makanan, dihitung dengan membandingkan distribusi frekuensi mangsa tertentu di lingkungan sekitar dan dalam makanan, seperti yang dijelaskan oleh Chesson (1978 ).

Eksperimen Evakuasi Vakuola Makanan

Eksperimen evakuasi vakuola makanan dilakukan untuk menyelidiki pengaruh kandungan silika diatom terhadap pencernaan N. scintillans. Dalam percobaan ini, sel N. scintillans dalam kultur stok didiamkan selama 1 hari sebelum dimulainya percobaan. Kemudian ~1.500 sel N. scintillans bebas vakuola diinokulasikan secara terpisah ke dalam 300 ml suspensi makanan yang mengandung konsentrasi sel yang sama (~1 mg C L−1) T. weissflogii atau T. pseudonana dengan kandungan silika tinggi atau rendah. Setelah inkubasi selama 24 jam, ~10 sel N. scintillans aktif yang mengandung vakuola makanan dipisahkan dari mangsanya, dan dipindahkan ke piring 6-sumur yang berisi 10 ml air laut yang diautoklaf dengan filter 0,2 m (4-6 ulangan). 

Sel diperiksa di bawah mikroskop bedah setiap jam selama 10 jam untuk yang sebelumnya dipelihara di T. weissflogii, dan setiap 3-7 jam selama ~ 30 jam untuk yang sebelumnya dipelihara di T. pseudonana. Pencernaan dianggap lengkap hanya ketika tidak ada jejak makanan di dalam sel. Laju defekasi vakuola makanan N. scintillans pada berbagai jenis mangsa diatom dihitung sebagai konstanta plot peluruhan eksponensial persentase sel dengan vakuola makanan vs. waktu kelaparan (Zhang et al., 2016). Volume vakuola makanan dalam sel N. scintillans (n ​​= 30) setelah inkubasi 1 d dihitung dari areanya, yang diukur menggunakan program citra SPOT (Versi 3.5.0) dan ImageJ (Versi 2.0.0), dan dengan asumsi bahwa mereka berbentuk bola.

Hasil

Konten Silika Diatom

Mangsa diatom T. weissflogii dan T. pseudonana tumbuh dalam cahaya rendah (yaitu, pada 15 mol foton m−2 s−1) secara konsisten mengandung tingkat silika biogenik yang jauh lebih tinggi daripada yang tumbuh dalam cahaya tinggi (yaitu, pada 200 mol foton m−2 s−1) selama penelitian kami (Tabel 1). Perbandingan lebih lanjut dari diatom yang ditumbuhkan pada tingkat intensitas cahaya tinggi dan rendah menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan dalam diameter bola ekivalennya (Tabel 1), tetapi sel-sel yang tumbuh di bawah kondisi cahaya rendah (yaitu, dengan kandungan silika tinggi, HSi) menghasilkan kandungan yang lebih tinggi dari diatom. karbon seluler (C), nitrogen (N) dan fosfor (P) (Tabel 2). Namun, signifikansi perbedaan kandungan unsur ini antara diatom silika tinggi dan rendah bervariasi antara T. weissflogii dan T. pseudonana. Sebagai contoh, kandungan P T. pseudonana dengan kandungan silika tinggi vs rendah berbeda nyata, sedangkan T. weissflogii tidak (Tabel 2; Uji-t Student, n = 6, p <0,05). Selain itu, variasi stoikiometri unsur sel diatom yang mengandung silika tinggi dan rendah hampir berlawanan untuk T. weissflogii dan T. pseudonana (Tabel 2). Selain itu, rasio unsur T. weissflogii dengan kandungan silika rendah dan tinggi semuanya berbeda nyata, selain rasio Si:N; sedangkan T. pseudonana tidak menunjukkan perbedaan yang nyata, kecuali rasio C:P.

Respon Penggembalaan Protista terhadap Diatom dengan Tingkat Kandungan Silika yang Berbeda

Dalam seri pertama percobaan penggembalaan (yaitu, 1 hari), baik N. scintillans dan Euplotes sp. menunjukkan pembersihan dan tingkat konsumsi yang lebih tinggi untuk T. pseudonana dengan kandungan silika rendah dibandingkan dengan yang memiliki kandungan silika tinggi (Gambar 1), meskipun perbedaannya tidak signifikan untuk Euplotes sp. (Uji-t siswa, n = 6, p < 0,05).

Tren yang sama juga diamati pada percobaan penggembalaan seri kedua (yaitu, 6 jam), di mana N. scintillans mengkonsumsi lebih banyak T. weissflogii dan T. pseudonana yang mengandung kandungan silika rendah daripada yang mereka lakukan dengan kandungan silika tinggi (Gambar 2 ). Tren ini diamati baik dalam perawatan diet tunggal dan campuran. Sebagai contoh, pada perlakuan diet campuran, N. scintillans membersihkan T. weissflogii dan T. pseudonana dengan kandungan silika rendah dengan laju masing-masing 2,98 ± 0,22 dan 2,78 ± 0,44 l Noc−1 h−1, sedangkan mereka membersihkan T. weissflogii dan T. pseudonana dengan kandungan silika tinggi pada masing-masing 1,86 ± 0,12 dan 0,65 ± 0,08 l Noc−1 h−1, (Gambar 2A,C). Oleh karena itu, dalam perlakuan diet campuran, indeks konsumsi mangsa N. scintillans untuk diatom dengan kandungan silika rendah secara signifikan lebih tinggi daripada mereka yang memiliki kandungan silika tinggi (Uji-t siswa, n = 6, p <0,05; Gambar 3). Hasil ini menunjukkan bahwa kandungan silika diatom dapat mempengaruhi aktivitas penggembalaan dan preferensi makan protozoa penggembala.

LAYANAN ADY WATER

Jual zeolit untuk filter air jenis Batu, Pasir, dan Tepung. Kemasan zeolit per karung 20 kilogram dan eceran 4 kilogram. Sudah suplai zeolit ke industri Food and Beverage, berbagai BUMN, kebutuhan softener (Pelunak Air / Pengurang Kesadahan Air) rumah tangga. Ready Stock, kemampuan suplai hingga puluhan ton rutin per bulan

Jual karbon aktif dengan merek import: HAYCARB, JACOBI, CALGON, dan NORIT. Merek karbon aktif lokal: KARBON AKTIF ADY WATER. Kemasan karbon aktif 25 kg per karung untuk karbon import, untuk karbon lokal 25 kg per karung dan 20 kg per karung. Menyediakan karbon aktif lokal eceran kiloan, untuk import tidak eceran. Fungsi karbon aktif untuk filter air bersih, filter air minum, filter air aquarium, filter air kolam, filter air proses industri, filter air lingkungan, dekolorisasi, gula rafinasi, pemulihan emas (gold recovery), menghilangkan klorin, bau pada air, dll.

Jual silica gel minimal pembelian 1 kg. Ukuran sachet silica gel yang dijual 1 gram, 2 gram, 5 gram, 10 gram, 25 gram, 50 gram, 100 gram, 250 gram, 500 gram, 1 kilogram. Jual silica gel curah per karung 25 kilogram. Sudah suplai silica gel untuk kebutuhan bandara, industri sepatu, makanan (FOOD GRADE), gas separasi / kromatografi kolom, aquarium, kebutuhan pribadi, dll

Nomor WA Sales Yang Mudah Dihubungi

Senang dapat membantu Anda, Semoga kami dapat segera menyelesaikan masalah air yang sedang Anda hadapi. Terimakasih

1. Ghani 0821 2742 4060

2. Yanuar 0812 2165 4304

3. Rusmana 0821 2742 3050

4. Fajri 0821 4000 2080

5. Kartiko 0812 2445 1004

6. Andri 0812 1121 7411

Alamat kantor/gudang Ady Water yang bisa dikunjungi langsung. 

Silahkan Bapak/Ibu mengunjungi alamat kantor/gudang kami. Kami akan melayani Anda dengan senang hati dan semoga dapat membantu masalah air yang sedang Anda hadapi. 

1. Alamat Bandung:

Jalan Mande Raya No. 26, RT/RW 01/02 Cikadut-Cicaheum, Bandung 40194

2. Alamat Jakarta Timur

Jalan Tanah Merdeka No. 80B, RT.15/RW.5 Rambutan, Ciracas, Jakarta Timur 13830

3. Alamat Jakarta Barat

Jalan Kemanggisan Pulo 1, No. 4, RT/RW 01/08, Kelurahan Pal Merah, Kecamatan Pal Merah, Jakarta Barat, 11480

Katalog Ady Water

http://bit.ly/KatalogAdyWater